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SPE固相萃取技术的基本方法及步骤

2016-5-11 14:27:14      点击:
固相萃取技术的基本方法及步骤
一、 SPE基本方法

  SPE实质上是一种液相色谱分离,所用的吸附剂也与液相色谱固定相相同,只是在粒度上有所区别。 SPE的一般做法是:利用选择性吸附与选择性洗脱的色谱分离原理,使液体样品通过吸附剂,保留其中的分析物,用适当强度溶剂洗除杂质,然后用少量溶剂洗脱分析物,达到快速分离净化与浓缩的目的。也有选择性吸附干扰杂质,而让分析物洗除,或同事吸附杂质和分析物,在使用合适的溶剂选择性洗脱分析物的做法。


二、 SPE技术的基本步骤如下

(1) 样品预处理:依目标分析物、样品基体和它们的保留型不同,对样品进行溶解、 pH 调节、离心分离、过滤、稀释和加缓冲溶液等处理。


(2) 萃取柱的活化处理:选一种溶剂通过 SPE小柱,以润湿和活化 SPE填料,试分析物能与固相表面紧密接触,易于发生吸附作用,还可除去柱内可能存在的杂质,减少污染;之后还须选择一种极性和 pH 值与样品基体相似的溶液替换溶剂, 以使样品溶液与吸附剂表面良好接触,提高萃取效率。


(3) 上样:将预处理好后的样品倒入活化后的 SPE小柱上,然后利用加压、抽真空或离心的方式,使液体样品以适当流速通过 SPE小柱。


(4) 淋洗:选择中等强度的混合溶剂, 尽可能洗涤除去基体重的干扰组分,又不会导致目标萃取物流失;


(5) 洗脱:用小体积的适当的洗脱溶剂将分析物洗脱下来并收集;挥干溶剂以备用或直接在分析。


    洗脱溶剂的强度选择非常关键, 要达到分析物尽可能被洗脱而比分析物吸附更强的杂质仍留在 SPE小柱上不被洗脱下来的效果。


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